通過分子生物學(xué)手段，表位標簽可融合至目的蛋白的 N 或 C 末端，常用的表位標簽有 His、HA、Myc 和 GST等。這些表位標簽通常不會影響目的蛋白的生物活性和細胞內(nèi)定位。表位標簽的出現(xiàn)，為科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)提供了方便，因為商業(yè)化的標簽抗體能特異性地識別標簽蛋白上的標簽，從而對目的蛋白進行后續(xù)的鑒定和分析。

融合標簽根據(jù)其相對分子質(zhì)量大小可以分為兩大類：大的蛋白質(zhì)分子和小的多肽片段。融合標簽的使用可以簡化蛋白質(zhì)的純化過程、控制蛋白質(zhì)固定的空間取向及方便檢測、使體內(nèi)生物事件可視化、提高重組蛋白質(zhì)的產(chǎn)量、增強重組蛋白質(zhì)的可溶性和穩(wěn)定性等。常用的標簽包括myc、HA、Flag、His、GST等。

Flag-tag是一段由8個氨基酸殘基組成的,N-DYKDDDDK-C(1012Da)。Flag標簽系統(tǒng)利用DYKDDDDK融合到目標蛋白。在蛋白表達和定位研究中, 可以通過基因工程技術(shù)手段將所要研究的目的基因和FLAG-tag基因序列連接起來,可以連接在目的蛋白的C端或N端, 然后將整合后的基因轉(zhuǎn)入細胞中或胚胎干細胞抑或受精卵中。后續(xù)檢測主要通過FLAG-tag這段肽鏈形成的免疫決定簇與其單克隆抗體的特異性結(jié)合來實現(xiàn)。檢測手段有免疫熒光(immunofluorescence), 免疫印記(Western Blotting)等。

His 標簽是一種分子量很小的表位標簽，通常由 6 至 10 個組氨酸（His）殘基組成，也被稱為多組氨酸標簽，hexa 組氨酸標簽，6xHis 標簽和 His6 標簽。His 標簽是蛋白純化和檢測的常用標簽之一，融合到重組蛋白后，對蛋白的結(jié)構(gòu)和特性幾乎沒有影響。抗 His 標簽抗體能檢測或純化 His 標記的靶蛋白，而無需利用蛋白質(zhì)特異性抗體或探針。

GST標簽體系具有蛋白表達產(chǎn)率高、表達產(chǎn)物純化方便，以及利于GST抗體制備等特點。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過親和層析得到。GST融合蛋白可被位點特異性蛋白酶裂解，從而除去GST蛋白。融合蛋白又是一個很好的強免疫原，因此，很容易制備抗新蛋白的抗體。正是由于以上的優(yōu)點，商品化的GST融合蛋白表達體系以及GST標簽抗體系統(tǒng)至今仍被廣泛應(yīng)用。

綠色螢光蛋白（Green Fluorescent Protein），簡稱GFP，這種蛋白質(zhì)早期是由下村脩等人在1962年在一種學(xué)名Aequorea victoria的水母中發(fā)現(xiàn)。其基因所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，在藍色波長范圍的光線激發(fā)下，會發(fā)出綠色螢光。

在1985年開發(fā)出鼠抗c-myc標簽抗體并被作為免疫化學(xué)試劑用于細胞生物學(xué)和蛋白質(zhì)工程領(lǐng)域中。Myc標簽（序列為：EQKLISEEDL）已成功應(yīng)用于WB雜交技術(shù)、免疫沉淀IP和流式細胞術(shù)中。因此可用于檢測重組蛋白在細菌、酵母、昆蟲細胞和哺乳細胞中的表達情況。

HA標簽系統(tǒng)利用一個HA (influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目標蛋白。

可用于檢測和純化各種商品化表達載體上的標簽序列，籍以分析檢目的蛋白的表達含量及其功能。其原理是抗原-抗體反應(yīng)，這些標簽抗體可以高度特異地結(jié)合對應(yīng)的標簽融合蛋白。

1、多種驗證
2、特異性高
3、反應(yīng)物種廣
4、稀釋比例佳

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